Уентуърт Милър е роден на 2 юни 1972 година в Чипинг Нортън, Великобритания.

Баща му има афроамерикански, ямайски, английски, германски и еврейски корени, а във вените на майка му тече русинска, френска, холандска, сирийска и ливанска кръв.

Семейството се мести в Бруклин, Ню Йорк, когато бъдещият актьор е на една година.

Уентуърт Милър има около 30 роли в киното и телевизията. Световна слава му носи ролята на Майкъл Скофийлд в хитовия сериал „Бягство от затвора“.

Участвал е и в „Бъфи, убийцата на вампири“, „Спешно отделение“, „Динотопия“, „Подземен свят“, „Шепот от отвъдното“, „Заразно зло: Живот след смъртта“, „Легендите на утрешния ден“, „Госпожо Държавен секретар“.

През август 2013 г. в писмо до организаторите на Санктпетербургския филмов фестивал, Уентуърт Милър разкрива, че е гей и отказва да участие във фестивала заради приетите същата година закони в Руската федерация, ограничаващи свободното публично слово, представящо ЛГБТ хората по позитивен начин.